青霉素V钾适用于青霉素敏感菌株所致的轻、中度感染，包括链球菌所致的扁桃体炎、咽喉炎、猩红热、丹毒等;肺炎球菌所致的支气管炎、肺炎、中耳炎、鼻窦炎;以及敏感葡萄球菌所致的皮肤软组织感染等。青霉素V钾也可作为风湿热复发和感染性心内膜炎的预防用药，亦可用于螺旋体感染。

口服给药：成人（1）链球菌感染：一次125～250mg，每6～8小时1次，疗程10日；（2）肺炎球菌感染：一次250～500mg，每6小时1次，疗程至退热后至少2日；（3）葡萄球菌感染、螺旋体感染(奋森咽峡炎)：一次250～500mg，每6～8小时1次；（4）预防风湿热复发：一次250mg，一日2次；（5）预防心内膜炎：在拔牙或上呼吸道手术前1小时口服本品2g，6小时后再加服1g。儿童（1）按体重，一次2.5～9.3mg/kg，每4小时1次；或一次3.75～14 mg/kg，每6小时1次；或一次5～18.7 mg/kg，每8小时1次。（2）预防心内膜炎：27kg以下小儿剂量比成人减半。